pcr结果如何分析,pcr结果图怎么看


PCR-RFLP结果如何分析 可能你得到的基因片段中有插入其他的序列 。
你可以用得到的420BP的序列减去原来目的扩增的352bp的序列 , 再用这个序列去blast 。
一基因被其他基因的插入其实发现的比较多的 , 最长见的是alu序列的插入 。 当然还有其他的转座子
如果你扩增的是癌基因 , 样本中多有这样的插入的话 , 这样的结果很有意义 。
如何分析real time PCR的数据结果

  • 第一步:在电脑上安装好GraphPad Prism软件 , 安装此软件在百度上可以下载 , 一般下载GraphPad Prism5中文版的 。
  • 第二步:完成第一步后在电脑上打开GraphPad Prism软件 , 会弹出对话框welcome to GraphPad Prism , 点击左边的Column , 选择右边的choose a graph第一排的第四个柱形图 。 其他部位不需要修改 , 点击右下角的Create 。
  • 【pcr结果如何分析,pcr结果图怎么看】第三步:第二步结束后会弹出一个新的对话框 , 接着你在ABCD等等那一排的下面的空白框里面输入你的实验分组(比如Control , Sample组之类的 , 以Control组和EAE组为例) 。
  • 第四步:第三步结束之后 , 往实验分组对应的下方添加你的QPCR实验数据 。 点击Graphs底下的Data-1 。 会弹出你的实验结果柱状图 。
  • 第五步:将X-title删掉 , Y-title改成QPCR的Relative Expression , 把Data-1改成你设计的引物 , 比如occludin 。
  • 第六步:结束第五步后开始进行统计学分析 。 点击左上方Analysis下面的Analyze 。 会弹出Analyze Data的对话框 。 将Column analyses下面改成t test(and nonparametric tests) , 点击OK出现新对话框 , 再点击OK , 出现新对话框 , 上面显示p value summary为三颗星 , 即代表该数据具有统计学意义 , 并且为三颗星 。
  • 第七步:返回属性图数据 。 即点击左边的Graphs下面的Data 1 , 点击最上面的Draw下面横线 , 选择横线 , 点击Write下面的黑体字T , 在横线上面标记星号或者ns即可 。 该例子里的统计学分析为3颗星 。 完美的QPCR数据分析图就做出来啦 。

实时荧光定量PCR的结果该怎样分析? 如果有标准曲线 , 按照标准曲线计算 。
一般都是相对量 , 则用delta delta CT方法来计算 。 举例如下:对照组基因A的CT值为20 , 内参:比如βactin)CT值15 。 实验组基因A CT值18 , 内参CT值14 。
如果是realtime做表达量 , 用excel的制图 , 将每个个体的Ct值平均数做出柱状图就可以了 。 如你还做了标曲 , 就用制图中的散点图看R2值 。 其实这些功能做定量PCR的时候电脑程序应该会自动分析才对 , 具体情况具体分析 。
技术原理
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后 , 完成高温变性 , 低温复性 , 适温延伸的热循环 , 并遵守聚合酶链反应规律 , 与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断 , 荧光素游离于反应体系中 , 在特定光激发下发出荧光 , 随着循环次数的增加 , 被扩增的目的基因片段呈指数规律增长 , 通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度 , 求得Ct值 , 同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照 , 即可得出待测标本目的基因的拷贝数 。
以上内容参考:

如何用grandp 分析pcr结果 学习做Realtime PCR, 实验结果是出来了 , 得到的内参、目的基因的Ct 值在15-25 之间 , 熔
融曲线基本上也是单峰 , 但不太会处理这个结果 , 对着数据发愁 。 。 。 不同的处理方法得到不
同的结果 。 。 。
做的是相对定量 , SYBR Green, 选用2^(-△ △ Ct)法
内参基因:对照组1、对照组2、对照组3
实验组1、实验组2、实验组3

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